Mutatie MPL

Staaltype:

Bloed of beenmerg EDTA

Volume:

Beenmerg min. 1 mL, bloed 4 ml (min. 1 mL)

Uitvoering:

Wekelijks / Antwoordtijd = max. 25 dagen

Afnamecondities:

Vers afgenomen met vermelding afnametijdstip op aanvraagformulier (datum en uur)

Verzending:

Binnen 24h na afname

Methode:

Next Generation Sequencing (NGS)

Techinfo:

MPL mutaties worden opgespoord met een NGS m.b.v. van een panel met een beperkt aantal genen (MPNmini panel).

Technische informatie NGS:
- Mutatieanalyse gebaseerd op massive parallel sequencing of next generation sequencing (NGS); voor volledig panel (3 genen) zie informatie bij `Mutatieanalyse van genen betrokken bij MPN mbv NGS`
- Enkel varianten met een VAF (Variant Allele Frequency) van > 5% met klinische relevantie worden gerapporteerd.  
- RefSeq (NCBI): NM_005373.2	
- Exon 10
- Codon: alle codons 
- Nucleotiden: c.1469-1566
- Coördinaten (chromosomale posities) van de nucleotiden van interesse (hg38): chr1:43349261-43349361

Uitvoering:
De library preparation, sequenering, primaire en secundaire data-analyse wordt uitgevoerd door het platform Moleculaire Diagnostiek UZ Gent (MDG) (https://www.cmgg.be/nl/zorgverlener/labguide/platform-moleculaire-diagnostiek-uz-gent-mdg) 	

Klinische info:

Naast de frequente mutatie c.1849G>T (p.(Val617Phe)) in JAK2 en mutaties in CALR, komen in ~5% van de patiënten met essentiële trombocytose (ET) of primaire myelofibrose (PMF) activerende mutaties voor in de thrombopoïetine receptor MPL. De detectie van een mutatie in MPL kan de diagnose van een ET of PMF bevestigen (diagnostisch belang). De meest voorkomende mutaties zorgen voor een missense mutatie in tryptofaan (Trp) 515, een aminozuur dat het MPL eiwit in een inactieve vorm houdt in de afwezigheid van een ligand. De meest frequente mutaties in MPL zijn substituties van Trp515 naar een leucine of lysine (exon 10) en worden gevonden in ~5 % van ETs en PMFs. Belangrijk hierbij is dat het verlies van het Trp, en niet het verwerven van een bepaald aminozuur, ervoor zorgt dat MPL geactiveerd wordt. Naast Trp515 zijn ook zeldzame mutaties in nucleotiden coderend voor andere aminozuren in exon 10 van MPL gerapporteerd. MPL mutaties in ET patiënten zijn gecorreleerd met een slechtere prognose (kortere OS), hoger risico op trombose en grotere kans op transformatie naar een secundaire myelofibrose of AML. Belangrijke publicaties: - Rumi, E., et al., Clinical effect of driver mutations of JAK2, CALR, or MPL in primary myelofibrosis. Blood, 2014. 124(7): p. 1062-9. - Cabagnols X. et al, Presence of atypical thrombopoietin receptor (MPL) mutations in triple-negative essential thrombocythemia patients. Blood 2016. 127(3): p. 333-42. - Milosevic Feenstra J.D. et al, Whole-exome sequencing identifies novel MPL and JAK2 mutations in triple-negative myeloproliferative neoplasms. Blood 2016. 127(3): p. 325-32. - Elala YC et ak, Calreticulin variant stratified driver mutational status and prognosis in essential thrombocythemia. Am J Hematol 2016 - Asp J et al, Mutation status of essential thrombocythemia and primary myelofibrosis defines clinical outcome. Haematologica 2016

Opmerkingen:

Belang pre-analytische fase - stabiliteit staal: 
Aparte, ongeopende EDTA buis voor moleculaire uitwerking.
Het staal moet binnen de 2 dagen na afname verzenden worden naar het Klinische Biologie, moleculaire diagnostiek hematologie (2P8) zodat dit binnen de 3 dagen na afname in het labo kan verwerkt worden. In tussentijd moet het staal in de koelkast bewaard worden (2-8°C). 

Terugbetaling:
Het opsporen van mutaties in MPL gen valt vanaf 1 november 2016 onder de RIZIV verstrekking 588512-588523, waarbij genafwijkingen door middel van een moleculair biologische methode worden opgespoord in de diagnostische investigatiefase van een chronische myeloproliferatieve neoplasie. Dit betekent dat binnen de diagnostiek van MPN, 2 testen (waaronder ook CALR en JAK2 mutaties) 1x per jaar kunnen worden aangerekend met een B-waarde van 3500 per test. 

Externe kwaliteits evaluatie:

Zelf georganiseerde externe kwaliteitscontrole

Accreditatie:

Ja (Accreditatie volgens BELAC-certificaat 087-MED)

Validatiedossier:

Ja

Gerelateerd:

Verantwoordelijke:

Apr. biol. B. Denys